发布时间: 2021-12-03 点击次数: 1605次 更新时间:2021-12-03
在生物医学和生物技术研究领域里,研究者经常需要把DNA、RNA、siRNA、多肽、蛋白质、抗体、药物以及其他物质导入细胞里,用于研究它们的生物功能。
BEX电转仪可高效地将核酸导入所有测试过的哺乳动物细胞类型中,包括难转染的细胞、原代细胞和干细胞等,具有相当出色的转染效率和极低的死亡率。
电转染过程中,细胞悬浮在可以保护细胞的缓冲液中,需要被导入细胞的物质被混合在缓冲液中,然后细胞样品加入电击管。将电击管插入适配器的孔中,关上翻盖将电击管接入电路。接着在屏幕上的控制界面完成参数设置,随后开始电转,电脉冲将流过细胞样品。完成电转后,屏幕上会出现一个波形图,此时电转已经完成,可以将电击管取出。
对于大多数细胞,电转时细胞密度需要至少10M/ml,推荐细胞密度在20M‐50M/ml。细胞密度越高可以增加细胞间电流辅助,从而增加细胞的有效电转面积。
需要特别注意的地方:一个样品加进电击管后,不要等候,马上进行电转,完成后再处理下一个样品,不要把一批样品全部加样完成后再一起电转。
等候时间过长,细胞沉降也会导致电击管内上下细胞密度不均匀而降低电转效率。电转完成后细胞可以马上取出培养,也可以等全部样品处理完毕再取出培养。
当细胞聚团时,其中只有一侧细胞可以被电转,中间和另一侧细胞不能被电转,降低BEX电转仪的效率。所以消化细胞过程中注意细胞不要成团。