荧光定量PCR仪校准

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荧光定量PCR仪校准主要应用于基础科学研究、疾病研究、临床医学诊断、出入境检验检疫、环境监测、药物研发等领域。

更新时间：2025-01-03

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荧光定量PCR仪校准

从PCR仪名称、原理、计量特性、计量校准条件、PCR检测仪温度校准、计量校准结果、计量周期七个方面做阐述。

一、名称

PCR仪（Polymerase Chain Reaction analyzer）是一种DNA聚合酶在温度场条件下使特定基因片段发生快速扩增的仪器。主要应用于基础科学研究、疾病研究、临床医学诊断、出入境检验检疫、环境监测、药物研发等领域。

二、基本原理

PCR仪主要由控制系统、电源系统、温控系统、检测系统和电源部件组成。其基本原理为：加了使双链DNA解开螺旋，在退火温度条件下引物同模板DNA杂交，在Taq DNA聚合酶，dNTPs,Mg2+和合适pH缓冲存在条件下延伸引物，重复“高温多变性（90-95）℃-适温延伸（70-75）℃"过程，使得测样本中的核酸呈指数级扩增，PCR仪工作的关键是温度控制。

三、计量特性

项目	定型PCR仪	定量PCR仪
温度示值误差	+	+
温度均匀度	+	+
平均升温速率	+	+
平均降温速率	+	+
样本示值误差	-	+
样本线性	-	+
注：+为校准项目；-为非校准项目

四、荧光定量PCR仪校准计量校准条件

仪器使用允许的环境条件，测温过程中应测量和记录环境的温度、相对湿度。

1、环境条件：温度（15-30）℃；湿度（10%-75%）RH

2、校准设备：PCR温度校验仪 JDPC-96；内置15个温度监控探头，探头材质为紫铜作为温度传导载体；温度传感器、温度反应迅速灵敏，测温精度小于0.1℃（中国计量规程精度为0.15℃）。

测温探头分布点如图

五、荧光定量PCR仪校准

1、测温点

项目	温度点	技术指标	备注
温度偏差	30℃	±0.5℃	1、所列出的技术指标为PCR仪恒温计时开始10s内到计时结束之间，某一规定的时刻点技术指标。 2、校准温度点可以根据客户实际使用的程序来确定，并不一定与给出的温度点一致。 3、超调温度包含最大超调温度与平均超调温度。
	50℃	±0.5℃
	60℃	±0.5℃
	70℃	±0.5℃
	90℃	±0.6℃
	95℃	±0.8℃
热盖温度偏差	105℃	±0.3℃
温度均匀度	30℃	≤1.0℃
	50℃	≤1.0℃
	60℃	≤1.0℃
	70℃	≤1.0℃
	90℃	≤1.5℃
	95℃	≤1.5℃
超调温度	50℃	≤5.0℃
超调温度	95℃	≤6.0℃
升温速率	30℃~95℃	≥1.5℃/s
降温速率	95℃~30℃	≥1.5℃/s